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【兽用名称】
通用名 华润娱乐注册彩票 鼎盛国际线上娱乐
商品名 无
英文名 ELISA Kit to Detect Antibody against FMD virus
汉语拼音 Zhu O xing Kou ti yi bing du ELISA kang ti jian ce shi ji he
【原理】
本试剂盒是采用猪O型口蹄疫病毒VP1基因工程表达产物包被微孔板，在试验中，加入稀释的对照血清和待检血清，经温育后，若样品中含有猪口蹄疫病毒VP1的特异性抗体，则将与检测板上抗原结合，经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后；再加入酶标二抗，与检测板上抗原抗体复合物发生特异性结合；再经洗涤除去未结合的酶结合物，在孔中加TMB底物液，与酶反应形成蓝色产物，加入HF溶液终止反应后，用酶标仪630nm波长测定各反应孔中的OD值。
【作用与用途】
用于检测猪血清中O型口蹄疫病毒抗体。适用于猪场口蹄疫病毒疫苗免疫状况的评价以及感染猪的血清学诊断。
【主要成分与含量】
1 抗原包被板 2块 （96孔/块）
2 阴性对照血清 （蓝色盖子） 1管 （1ml/管）
3 阳性对照血清 （红色盖子） 1管 （1ml/管）
4 羊抗猪酶标二抗（蓝色盖子） 1瓶 （20ml/瓶）
5 20倍浓缩洗涤液（白色盖子） 1瓶 （30ml/瓶）
6 底物液A （红色盖子） 1瓶 （10ml/瓶）
7 底物液B（黑色盖子） 1瓶 （10ml/瓶）
8 终止液 （蓝色盖子） 1瓶 （10ml/瓶）
9 样品稀释液 （黄色盖子） 1瓶 （50ml/瓶）
10 血清稀释板 2块 （96孔/板）
11 说明书 1张
【样品制备】
取动物全血，按常规方法制备血清，要求血清清亮，无溶血。
【洗涤液配制】
使用前，浓缩的洗涤液应恢复至室温（25℃左右），并摇动使沉淀的盐溶解（在37℃水中加热5~10分钟），然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释（例如：每板用20ml浓缩液加上380ml水），稀释好的洗涤液在2~8℃可以存放7天。
【样品和对照稀释】
样品稀释：在血清稀释板中按1:32的体积稀释待检血清样品（155μl样品稀释液中加5μl待检血清样品）。
对照稀释：在血清稀释板中按1:4分别稀释阳性对照和阴性对照（180μl样品稀释液中加60μl对照血清）。
【注意事项】
1 试剂盒使用前各试剂应平衡至室温，使用后放回2~8℃。
2 不同批号试剂盒的试剂组分不得混用，使用试剂时应防止试剂污染。
3 不要用口移液。
4 底物液B不要暴露于强光，避免接触氧化剂。
5 未使用的抗原包被板切记不要撕开上面的封口膜。
6 待检血清样品数量较多时，应先使用血清稀释板稀释完所有要检测血清，再将稀释好的血清转移到检测板，使反应时间一致。
7 浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水稀释，如果发现有结晶加热使其溶解后再使用。
8 严格按照操作说明书可以获得的结果。
【用法与判定】
1 取抗原包被板（根据样品多少，可拆开分次使用），每孔加入稀释好的洗涤液200μl,静置3分钟倒掉液体，并在吸水纸上拍干，共计洗板2次。再分别将稀释好的待检血清和对照各取100μl加入到抗原包被板孔中，待检样品做1孔，阴性对照和阳性对照各设2孔，每孔100μl.轻轻振匀孔中样品（勿溢出），置37℃温育30分钟。
2 甩掉板孔中的溶液，每孔加入稀释好的洗涤液200μl,静置3分钟倒掉，再在吸水纸上拍干，共计洗涤5次，
3 每孔加羊抗猪酶标二抗100μl,置37℃温育30分钟。
4 洗涤5次， 方法同2.切记每次在干净吸水纸上拍干。
5 每孔先加底物液A一滴（50?l）、再加底物液B一滴（50?l），混匀，室温（18℃~25℃）避光显色10分钟。
6 每孔加终止液一滴（50μl），10分钟内测定结果（测定前在震荡器上轻轻震动一下）。
【结果判定】
在酶标仪上测各孔的OD630nm值。试验成立的条件是阳性对照孔的平均OD630nm值均≥0.8,阴性对照孔的平均OD630nm值均<0.3.
样品OD630nm值≥0.4时判为阳性；样品OD630nm值<0.4时判为阴性。
注意：用620~650纳米波长测定结果均有效。
间接血凝试验（HIA）和酶联免疫吸附试验（ELISA）结果对比分析
间接血凝试验（HIA） 小于1:128 1:128~1:256 1:512~1:2048 大于1:2048
酶联免疫吸附试验（ELISA） 小于0.40 0.40~0.70 0.70~1.20 大于1.20
注：以上结果仅供参考。
【贮 存】 2~8℃避光保存
【有 效 期】 10个月
【生产企业】 武汉科前动物生物制品有限责任公司